अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेंट्रीफ्यूज ट्यूब पुन्हा वापरल्या जाऊ शकतात?येथे उत्तर आहे

सेंट्रीफ्यूज ट्यूब ही एक साधी नलिका आहे जी उच्च घूर्णन गती आणि दाब सहन करू शकते, जसे की काही नमुने वेगळे करणे आणि सुपरनेटंट गाळ वेगळे करणे.अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये आतील नळी आणि बाहेरील नळीसारखे दोन भाग असतात.आतील ट्यूब एक विशिष्ट आण्विक वजन असलेली एक पडदा आहे.हाय-स्पीड सेंट्रीफ्यूगेशन दरम्यान, ज्यांचे आण्विक वजन कमी आहे ते खालच्या नळीमध्ये (म्हणजे बाहेरील नळी) गळती करतील आणि ज्यांचे आण्विक वजन मोठे असेल ते वरच्या नळीत (म्हणजे आतील नळी) अडकतील.हे अल्ट्राफिल्ट्रेशनचे तत्त्व आहे आणि बहुतेकदा नमुने एकाग्र करण्यासाठी वापरले जाते.

अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेंट्रीफ्यूज ट्यूब्स सहसा प्रीट्रीटमेंटशिवाय वापरल्या जाऊ शकतात, परंतु प्रोटीन नमुना प्रक्रियेसाठी, विशेषत: सौम्य प्रोटीन सोल्यूशन्ससाठी (< 10ug / ml), अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्लीसह एकाग्रतेचा पुनर्प्राप्ती दर बहुतेक वेळा परिमाणात्मक नसतो.जरी पीईएस सामग्री अविशिष्ट शोषण कमी करते, काही प्रथिने, विशेषत: जेव्हा ते सौम्य असतात, समस्या असू शकतात.वैयक्तिक प्रथिनांच्या संरचनेनुसार गैर-विशिष्ट बंधनाची डिग्री बदलते.चार्ज केलेले किंवा हायड्रोफोबिक डोमेन असलेले प्रथिने वेगवेगळ्या पृष्ठभागावर अपरिवर्तनीयपणे बांधले जाण्याची शक्यता असते.अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेंट्रीफ्यूज ट्यूबच्या पृष्ठभागावर पॅसिव्हेशन प्रीट्रीटमेंट केल्याने पडद्याच्या पृष्ठभागावरील प्रथिने शोषण कमी होऊ शकते.बहुतेक प्रकरणांमध्ये, सौम्य प्रोटीन सोल्यूशन एकाग्र करण्यापूर्वी स्तंभाची पूर्व-उपचार केल्यास पुनर्प्राप्ती दर सुधारू शकतो, कारण द्रावण झिल्ली आणि पृष्ठभागावर उघडलेल्या रिक्त प्रोटीन शोषण साइट्स भरू शकतो.पॅसिव्हेशन पद्धती म्हणजे पॅसिव्हेशन सोल्युशनच्या जास्त व्हॉल्यूमसह कॉलम 1 तासापेक्षा जास्त काळ भिजवून ठेवणे, डिस्टिल्ड वॉटरने कॉलम पूर्णपणे धुवा आणि नंतर डिस्टिल्ड वॉटरने एकदा सेंट्रीफ्यूज करा जेणेकरुन फिल्मवरील पॅसिव्हेशन सोल्यूशन पूर्णपणे काढून टाका. .पॅसिव्हेशन नंतर फिल्म कोरडे होऊ नये याची काळजी घ्या.जर तुम्हाला ते नंतर वापरायचे असेल, तर तुम्हाला फिल्म ओलसर ठेवण्यासाठी निर्जंतुकीकरण केलेले डिस्टिल्ड पाणी घालावे लागेल.

अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेंट्रीफ्यूज ट्यूब्स सहसा निर्जंतुक केल्या जाऊ शकत नाहीत आणि पुन्हा वापरल्या जाऊ शकत नाहीत.एकाच नळीची किंमत स्वस्त नसल्यामुळे, बरेच लोक ते पुन्हा वापरण्याचा प्रयत्न करतात – अनुभव असा आहे की डिस्टिल्ड वॉटरने पडदा पृष्ठभाग अनेक वेळा स्वच्छ करणे आणि एक किंवा दोनदा सेंट्रीफ्यूज करणे.रिव्हर्समध्ये सेंट्रीफ्यूज करता येणारी छोटी ट्यूब डिस्टिल्ड वॉटरमध्ये बुडवता येते आणि नंतर जास्त वेळा रिव्हर्समध्ये सेंट्रीफ्यूज करता येते, जे अधिक चांगले होईल.ते एकाच नमुन्यासाठी वारंवार वापरले जाऊ शकते आणि वापरात नसताना डिस्टिल्ड पाण्यात भिजवले जाऊ शकते, परंतु जिवाणू दूषित होण्यास प्रतिबंध केला जाईल.भिन्न नमुने मिसळू नका.काही लोक म्हणतात की 20% अल्कोहोल आणि 1n NaOH (सोडियम हायड्रॉक्साईड) मध्ये भिजल्याने बॅक्टेरियाची वाढ रोखता येते आणि कोरडे होण्यास प्रतिबंध होतो.जोपर्यंत अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्ली पाण्यावर आक्रमण करते तोपर्यंत ते कोरडे होऊ दिले जाऊ शकत नाही.तथापि, इतर म्हणतात की ते झिल्लीची रचना नष्ट करेल.कोणत्याही परिस्थितीत, उत्पादक सामान्यतः पुनर्वापरास समर्थन देत नाहीत.वारंवार वापर केल्याने फिल्टर झिल्लीच्या छिद्राचा आकार अवरोधित होईल आणि द्रव गळती देखील होईल, ज्यामुळे प्रायोगिक परिणामांवर परिणाम होईल.